临床肝胆病杂志

北大核心,CA,JST,Pж(AJ),WJCI

国内刊号:22-1108/R

国际刊号:1001-5256

临床肝胆病杂志2016年第11期:HBV rtA181T突变对Huh7细胞自噬的影响

发布日期:

作者:时景仁, 郭向华, 王洁琳, 王珊珊, 乔录新, 陈德喜

单位:首都医科大学附属北京佑安医院北京市肝病研究所

关键词:肝炎病毒,乙型, 突变, 自噬

基金:

基金项目: 

国家自然科学基金(81361120401); 首都卫生发展科研专项项目(首发2014-1-1151); 肿瘤侵袭和转移机制研究北京市重点实验室开放课题(2015ZLQX05); 

目的探讨HBV逆转录酶区A181T(rtA181T)位点突变对Huh7细胞自噬的影响。方法 Huh7细胞分别转染1.3mer HBV野生型质粒(WT组)、1.3mer HBV rtA181T突变型质粒(181T组)及1∶1共转WT和rtA181T突变型质粒(WT+181T组)。Western Blot、免疫荧光检测细胞内HBV表面蛋白(HBs)表达水平,ELISA检测细胞外HBs Ag表达水平;Western Blot分析内源性自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)及P62表达水平,Real-time PCR检测自噬相关基因Atg5 mRNA、Beclin1 mRNA的转录水平;同时转染绿色荧光蛋白LC3后,免疫荧光检测自噬颗粒。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果免疫荧光观察181T组、WT组及WT+181T组细胞内均有HBs表达,Western Blot结果显示181T组细胞内的HBs表达高于WT组和WT+181T组。ELISA检测3组细胞培养上清的HBs Ag水平差异有统计学意义(F=66.739,P<0.001),其中18...

来源:2016年第11期

《临床肝胆病》期刊编辑部

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