临床肝胆病杂志

基金项目: 

四川省科技计划-重点研发计划(重大科技专项)(2017SZYZF0015)； 

目的探讨Hic-5基因敲除对NF-κB/p65表达及肝纤维化的影响。方法野生型C57BL/6雄性小鼠10只,随机分为2组,野生型对照组（WT-Control,n=5）、野生型实验组（WT-CCl4,n=5）; Hic-5基因敲除C57BL/6雄性小鼠10只,随机分为2组,敲除对照组（Hic-5 KO-Control,n=5）、敲除实验组（Hic-5 KO-CCl4,n=5）。检测血清ALT和AST;天狼猩红染色观察肝组织胶原沉积;免疫组化检测α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、p65蛋白表达;定量PCR检测肝组织中α-SMA、Collagen1、p65 mRNA表达。分离小鼠原代肝星状细胞,在予以不同浓度TGFβ1刺激后定量PCR检测肝星状细胞中α-SMA、Collagen1、p65 mRNA的表达。多组间计量资料比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果天狼猩红染色显示,与WT-CCl4组相比较Hic-5 KO-CCl4组肝组织胶原纤维减少（P值<0. 001）。血清ALT和AST检测结果提示WT-Control组、WT-CCl4组、Hic-5 KO-Control组、Hic-5 KO-CCl4组间ALT、AST比较差异均有统计学意义（F值分别为22.85、25.15，P值均＜0.001），Hic-5 KO-CCl4组血清ALT和AST水平均低于WT-CCl4组（P值均＜0.05）；免疫组化显示WT-Control组、WT-CCl4组、Hic-5 KO-Control组、Hic-5 KO-CCl4组4组间肝组织α-SMA、p65蛋白表达水平比较差异均有统计学意义(F值分别为207.10、9816，P值均＜0.001），Hic-5 KO-CCl4组肝组织α-SMA、p65蛋白表达量低于WT-CCl4组（P值均＜0.01）；定量PCR结果示WT-Control组、WT-CCl4组、Hic-5 KO-Control组、Hic-5 KO-CCl4组4组间肝组织α-SMA、Collagen1、p65 mRNA相对表达量比较差异均有统计学意义（F值分别为41.62、13.93、98.16，P值均＜0.001），Hic-5 KO-CCl4组肝组织α-SMA、Collagen1、p65 mRNA相对表达量低于WT-CCl4组（P值均＜0.05）；0 ng/ml、5 ng/ml、10 ng/ml TGFβ1刺激原代肝星状细胞，WT(0 ng/ml、5 ng/ml、10 ng/ml)组及KO(0 ng/ml、5 ng/ml、10 ng/ml)组间α-SMA、Collagen1、p65 mRNA相对表达量比较差异均有统计学意义（F值分别为53.90、75.82、52.41，P值均＜0.001），不同浓度TGFβ1刺激原代肝星状细胞Hic-5 KO组α-SMA、Collagen1、p65 mRNA相对表达量均低于WT组（P值均＜0.01）。结论Hic-5基因敲除抑制NF-κB/p65表达，抑制肝星状细胞活化，缓解CCl4诱导的肝纤维化。

来源：2019年第11期

《临床肝胆病》期刊编辑部

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