临床肝胆病杂志

基金项目: 

国家自然科学基金 (81374025);

国家自然科学基金

  目的  基于网络药理学方法探索消癥活络方(XZHLF)防治肝纤维化的作用机制。  方法  通过TCMSP数据库、化学专业数据库、ETCM数据库、化源网数据库、PubChem数据库以及文献查阅，收集XZHLF各中药化学成分，利用Swiss ADME数据库筛选出XZHLF各中药活性成分，利用Swiss Target Prediction数据库预测XZHLF各中药活性成分靶点；通过GeneCards、OMIN数据库收集肝纤维化疾病靶点，利用韦恩图获得XZHLF防治肝纤维化的潜在作用靶点。使用Cytoscape 3.7.1软件建立XZHLF“药物-活性成分”网络和XZHLF防治肝纤维化的“活性成分-潜在作用靶点”网络。在Metascape数据库对潜在作用靶点进行GO和KEGG富集分析，选取富集基因数最多的前20条绘制气泡图。对前20条KEGG通路中的MAPK信号通路进行分析，绘制“活性成分-潜在作用靶点-通路”网络图。将健康的SD大鼠随机分为6组，分别为空白对照组(K组)、模型组(M组)、秋水仙碱阳性对照组(Y组)、XZHLF高(G组)、中(Z组)、低(D组)剂量组，利用CCl4诱导大鼠肝纤维化进行造模，造模同时给药，共8周。通过Western Blot法检测各组大鼠肝组织内ERK5、p-ERK5、MEK5、MEKK3蛋白的相对含量和表达情况。计量资料多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。  结果  从XZHLF中筛选出110个活性成分，作用于923个活性成分靶点，与6823个肝纤维化疾病靶点相映射得到潜在作用靶点647个。XZHLF可能通过MAPK信号通路等通路，通过MAPK级联反应的调控等生物过程，作用于EGFR、AKT1、IKBKB、MAPK8、PDGFRB等多个蛋白靶点，从而发挥防治肝纤维化的作用。M组的大鼠肝组织内ERK5、p-ERK5、MEK5和MEKK3蛋白水平较K、Y、G、Z、D组明显增加，差异均有统计学意(P值均＜0.05)；K组的大鼠肝组织内ERK5、p-ERK5、MEK5和MEKK3蛋白水平较Y、G、Z、D组明显减少，差异均有统计学意义(P值均＜0.05)。  结论  基于网络药理学的方法预测出XZHLF可能通过MAPK信号通路防治肝纤维化，通过实验验证XZHLF是通过MAPK信号通路家族中ERK5通路抗肝纤维化。XZHLF高剂量组的抗肝纤维化作用效果最为明显。

来源：2021年第3期

《临床肝胆病》期刊编辑部

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