临床肝胆病杂志

基金项目: 

国家自然科学基金 (81800548)

  目的  探究肝星状细胞(HSC)炎症在慢加急性肝衰竭(ACLF)小鼠模型发病过程中的作用及机制。  方法  45只雄性昆明种小鼠随机分为对照组、模型组及N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)组，每组15只。模型组、NAC组注射人血白蛋白构建慢性肝病模型，之后腹腔注射内毒素(LPS)+D-GlaN诱导ACLF，对照组注射等量生理盐水, NAC组诱导ACLF前1周开始应用NAC。模型组及NAC组小鼠腹腔注射LPS+D-GlaN 48 h后处死。ELISA法检测血清AST、ALT及肝组织丙二醛及超氧化物歧化酶水平，肝组织行HE染色并进行病理评分，ELISA法检测小鼠血清LPS、IL-1β水平。在有或无NAC的情况下用LPS、H2O2刺激LX2细胞，ELISA法检测培养基中IL-1β及IL-6水平。用LPS、H2O2刺激LX2细胞，收取LX2培养基培养HL7702细胞，Western Blot检测HL7702细胞Caspase 8和Caspase 3表达，流式细胞法检测细胞凋亡。计量资料多组间比较采用单因素方差分析，方差齐时用LSD-t检验进行两两比较，方差不齐时采用Tamhane’s T2进行检验。Kaplan-Meier法绘制生存曲线，生存分析采用log-rank检验。  结果  48 h时对照组小鼠全部存活，模型组小鼠存活3只、NAC组存活8只。NAC组小鼠48 h累积生存率优于模型组(P＜0.001)；模型组血清AST、ALT及肝组织丙二醛水平较对照组和NAC组显著升高，肝组织超氧化物歧化酶水平显著降低(P值均＜0.001)；模型组小鼠肝脏病理评分明显高于对照组和NAC组(P值均＜0.05)。LPS、H2O2均可促进LX2细胞产生IL-1β、IL-6，NAC能够有效抑制LPS、H2O2的促炎作用(P值均＜0.05)；H2O2、LPS作用于LX2细胞促进HL7702细胞凋亡(P值均＜0.05)。  结论  LPS通过ROS促进HSC炎症，诱导肝细胞凋亡参与肝衰竭的疾病进程。

来源：2021年第3期

《临床肝胆病》期刊编辑部

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