临床肝胆病杂志

北大核心,CA,JST,Pж(AJ),WJCI

国内刊号:22-1108/R

国际刊号:1001-5256

临床肝胆病杂志2021年第4期:巨噬细胞对小鼠诱导多能干细胞向肝祖细胞分化的影响

发布日期:

作者:宫甜甜, 黄少刚, 孙瑞珍, 申景岭, 李秋明, 雷蕾, 单智焱

单位:1.哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室,哈尔滨1500812.哈尔滨医科大学大庆校区组织学与胚胎学教研室,黑龙江大庆163319

关键词:多能干细胞, 肝祖细胞, 巨噬细胞, 细胞分化, 小鼠, 近交C57BL

基金:

基金项目: 

黑龙江省自然科学基金(面上项目) (C2018040);

  目的  探讨巨噬细胞(Mc)对小鼠诱导多能干细胞(iPSCs)向肝祖细胞(HPCs)分化的影响。  方法  C57BL/6N小鼠24只,采取腹腔冲洗法获得巨噬细胞,收集上清获得巨噬细胞条件培养基(Mc-CDM)。通过激活素A、骨形态发生蛋白4和成纤维细胞生长因子等诱导小鼠iPSCs向HPCs分化。将HPCs的诱导分为两组,一组使用正常培养基,为对照组(Ctrl组); 另一组在诱导D5使用Mc-CDM培养基,为实验组(Mc组)。通过形态学、免疫荧光、Western Blot检测方法,比较正常Ctrl组与Mc组HPCs的形态及相关蛋白表达的差异。计量资料两组间比较采用t检验。  结果  在体外建立了iPSCs来源的HPCs;HPCs具有向肝细胞分化的潜能。免疫荧光结果显示:与第12天的Ctrl组相比,第12天的Mc组的肝祖细胞特异性蛋白CK19的表达显著增高(0.901±0.072 vs 0.686±0.097,t=-3.093,P < 0.05);Western Blot结果显示:与第12天Ctrl组相比,第12天Mc组肝祖细胞相关蛋白CK19的表达显著增高(1.922±0.103 vs 1.448±0.012,t=-7.881,P < 0.05);同时,第12天Mc组自噬相关蛋白LC3的表达亦显著增高(1.392±0.042 vs 1.101±0.048,t=-5.978,P < 0.05)。  结论  巨噬细胞可促进小鼠iPSCs向HPCs分化,其机制可能与HPCs细胞自噬水平增加有关。

来源:2021年第4期

《临床肝胆病》期刊编辑部

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