临床肝胆病杂志

贵州省科技计划项目 (黔科合基础〔2020〕1Y425);

  目的  初步探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)激动剂预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤大鼠模型的影响及可能机制。  方法  54只健康SPF级SD雄性大鼠随机平均分为3组。5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸(AICAR)组(实验组)、缺血再灌注组(对照组)和假手术组, 每组18只。每组分别于肝缺血再灌注术后12、24、72 h取材，检测ALT、AST、TBil、TNFα和IL-6浓度，肝三磷酸腺苷(ATP)水平，HE染色观察肝组织学变化，实时荧光定量PCR检测AMPK、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、葡萄糖转运蛋白4型(GLUT4)、多药耐药蛋白2(MRP2)的mRNA相对表达水平，Western Blot检测磷酸化AMPK、磷酸化mTOR、磷酸化GLUT4、MRP2的蛋白表达水平。多组间比较采用重复测量资料的方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。  结果  HE染色结果显示，实验组肝损伤程度在各时点都较对照组轻。术后12、24、72 h，对照组血清ALT、AST、TBil、IL-6、TNFα均高于实验组和假手术组，而实验组均高于假手术组(P值均 < 0.05)。术后12、24、72 h，实验组肝组织ATP水平均高于对照组和假手术组，而对照组均低于假手术组(P值均 < 0.05)。术后12、24、72 h，实验组AMPK、GLUT4、MRP2 mRNA相对表达水平及磷酸化AMPK、磷酸化GLUT4、MRP2蛋白表达水平均高于对照组和假手术组(P值均 < 0.05)；对照组AMPK mRNA相对表达水平及磷酸化AMPK蛋白表达水平均高于假手术组，而GLUT4、MRP2 mRNA相对表达水平及磷酸化GLUT4、MRP2蛋白表达水平均低于假手术组(P值均 < 0.05)。实验组mTOR mRNA相对表达水平及其磷酸化mTOR蛋白表达水平均低于对照组和假手术组(P值均 < 0.05)；对照组mTOR mRNA相对表达水平及其磷酸化mTOR蛋白表达水平均高于假手术组(P值均 < 0.05)。  结论  AICAR预处理能激活AMPK信号通路，改善能量代谢途径，减轻肝脏炎症反应，从而降低肝缺血再灌注损伤程度。

来源：2021年第5期

《临床肝胆病》期刊编辑部

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