临床肝胆病杂志

基金项目: 

国家自然科学基金 (81974442);

广东省自然科学基

  目的  了解中性胆固醇酯水解酶1(neutral cholesterol ester hydrolase 1, NCEH1)基因在肝癌组织及人肝癌细胞系中表达水平, 观察NCEH1基因敲减对SMMC-7721人肝癌细胞系增殖、凋亡、侵袭及转移能力的影响。  方法  选取2013年1月—2019年6月在暨南大学附属广州红十字会医院手术治疗的32例肝癌患者标本及对应的癌旁组织, 采用实时荧光定量PCR方法检测NCEH1基因的相对表达量。从ICGC数据库下载截至2020年9月份的肝癌样本基因表达数据, 应用R软件整理数据, 筛选出每个样本中NCEH1基因表达量, 分别采用配对Wilcoxon符号秩检验和Wilcoxon秩和检验分析肝癌与癌旁组织间的差异。采用实时荧光定量PCR方法检测NCEH1基因在SMMC-7721、Bel-7402、HepG2、Hep3B人肝癌细胞系和HL7702正常人肝细胞系中的表达水平。通过慢病毒介导的小干扰RNA(siRNA)技术构建NCEH1基因敲减的SMMC-7721人肝癌细胞系, 分为NCEH1敲减组(KD组)和阴性对照组(NC组), 以实时荧光定量PCR法检测NCEH1基因的敲减效率, 再以MTT检测实验、Annexin V-APC单染法流式细胞仪检测、划痕愈合实验、Transwell实验和Transwell侵袭小室实验检测2组SMMC-7721肝癌细胞的增殖、凋亡、转移和侵袭能力, 采用t检验对两组间数据进行统计学分析。  结果  NCEH1基因在肝癌组织中的平均表达量高于癌旁组织(本院标本Z=2.263, P=0.024, ICGC数据库U=18 768, P＜0.001)。NCEH1基因在中等侵袭转移潜能的SMMC-7721细胞系中的表达量最高; 在低侵袭转移潜能的Bel-7402和HepG2细胞系中的表达水平次之, 在无侵袭转移潜能的Hep3B细胞系中的表达水平最低。KD组SMMC-7721细胞中NCEH1基因的表达水平明显低于NC组(t=11.578, P=0.000 3), NCEH1基因的敲减效率高达74.0%。较之NC组, KD组细胞生长速度明显减缓(t=32.10, P＜0.001);细胞凋亡率明显升高(t=27.303, P＜0.001);迁移率、转移和侵袭细胞数均明显降低(t值分别为9.51、38.123、22.331, P值均＜0.001)。  结论  NCEH1基因在肝癌组织及细胞系中的表达明显升高, 且可促进肝癌细胞的生长增殖及侵袭转移并抑制凋亡, 提示其可能是一个潜在的肝癌治疗靶点。

来源：2021年第8期

《临床肝胆病》期刊编辑部

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