临床肝胆病杂志

甘肃省青年科技基金计划资助项目 (21JR1RA149);

  目的  研究甲胎蛋白(AFP)对肝癌HepG2细胞迁移和侵袭能力的影响及其机制。  方法  应用合成的靶向沉默AFP小干扰RNA(siRNA)转染肝癌HepG2细胞, 分为空白对照、阴性对照组及AFP siRNA组, 各组细胞干预48 h后, 采用实时定量PCR(qRT-PCR)和ELISA法检测细胞转染后的沉默效率, Transwell小室实验检测沉默AFP基因后HepG2细胞的侵袭、迁移能力, 用Western blotting法观察沉默AFP基因的表达对上皮-间质转化(EMT)相关蛋白(N-cadherin、Vimentin和E-cadherin)、AKT和p-AKT蛋白表达的影响。计量资料多组间比较采用单因素方差分析, 进一步两两比较采用LSD-t检验。  结果  转染沉默后, 与空白对照组相比, AFP siRNA组中AFP mRNA的相对表达量明显降低(P＜0.01), 抑制率达86.440%, 同时AFP siRNA组细胞上清液中AFP蛋白表达水平同样明显降低(P＜0.01)。与空白对照组相比, AFP siRNA组的迁移细胞数和侵袭细胞数显著下降, 差异具有统计学意义(P值均＜0.01)。沉默HepG2细胞中AFP基因的表达后, 与空白对照组比较, AFP siRNA组EMT相关蛋白E-cadherin蛋白的表达水平升高(P＜0.01), 而N-cadherin及Vimentin表达水平均明显降低(P值均＜0.05), 且PI3K/AKT信号通路相关蛋白p-AKT的表达水平明显降低(P＜0.01)。  结论  沉默AFP可抑制肝癌细胞转移, 基于HepG2细胞株的机制研究可能与阻断PI3K/Akt通路抑制EMT相关。

来源：2021年第8期

《临床肝胆病》期刊编辑部

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