临床肝胆病杂志

作者：李大志, 黄俊杰, 郑树森, 章爱斌

单位：a.浙江大学医学院第一附属医院多器官联合移植重点实验室，杭州310000b.浙江大学医学院第一附属医院肝胆外科，杭州310000

关键词：癌, 肝细胞, 活性氧, 抗药性, 肿瘤, 硫氧还蛋白还原酶1

基金：

  目的  耐药性是肝细胞癌(HCC)化疗失败的主要原因，硫氧还蛋白还原酶1(TXNRD1)作为活性氧(ROS)代谢的主要影响因素，已被证明与HCC患者的不良预后有关。本研究探究TXNRD1在HCC多药耐药机制中的作用。  方法  选取BEL-7402细胞系的BEL/FU细胞作为多重耐药细胞株。siRNA用来干预细胞TXNRD1的表达；实时定量PCR和蛋白质印迹检测TXNRD1的表达；CCK-8法检测和流式细胞术检测用来评估TXNRD1对肝癌细胞ROS蓄积、5-氟尿嘧啶(5-Fu)和多柔比星(DOX)耐药性以及体外凋亡的影响；异种肿瘤移植模型的构建用来研究金诺芬(AUR)在体内对细胞耐药性的影响。计量资料两组间比较采用独立样本t检验。  结果  BEL/FU作为多重耐药HCC细胞系表现出TXNRD1 mRNA与蛋白水平的高表达(P值均＜0.05)。AUR作为TXNRD1的抑制剂，联合化疗药物5-FU及DOX处理与单一化疗药物处理相比，细胞克隆集落形成数目明显减少(P值均＜0.01)，凋亡比例明显增加(P值均＜0.001)。N-乙酰半胱氨酸(NAC)作为ROS的清除剂，可以明显削弱siRNA敲低TXNRD1表达对BEL/FU细胞耐药性的影响，应用NAC可以有效降低干扰后细胞的凋亡比例(P值均＜0.001)。动物实验也证实，5-Fu与AUR联合治疗相对于单一5-Fu治疗，裸鼠的肿瘤质量更轻(P＜0.001)，体积更小(P＜0.001)。  结论  TXNRD1在HCC耐药中扮演重要角色，抑制其在细胞水平作用可有效改善耐药性，AUR作为TXNRD1抑制剂在HCC综合治疗中也具备极大的应用前景。

来源：2022年第2期

《临床肝胆病》期刊编辑部

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