临床肝胆病杂志

基金项目: 

国家重点研发计划项目 (2017YFC0909900);

  目的  探究不同浓度多房棘球蚴分泌物抗原(Em-sAg)对脂多糖(LPS)诱导小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC)表型和功能的影响。  方法  小鼠骨髓腔中所分离的骨髓前体细胞，经小鼠重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)刺激后形成BMDC，于正倒置显微镜下观察细胞形态。用流式细胞术鉴定BMDC纯度后，分为Control组、阳性对照组(LPS 1 μg/mL)、LPS+3 mg/mL Em-sAg组、LPS+1.5 mg/mL Em-sAg组、LPS+0.75 mg/mL Em-sAg组、LPS+0.375 mg/mL Em-sAg组共6组。流式细胞术检测各组BMDC表面分子(CD80、CD86、MHC-Ⅱ分子)的表达情况，ELISA法检测各组细胞因子IL-12p70的表达水平。满足正态分布的计量资料多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验表示。  结果  在正倒置显微镜下观察到，培养8~10 d的细胞可见毛刺样突起，细胞呈完全悬浮状态。流式细胞术检测发现，CD11c的阳性率均在70%以上，据此鉴定所培养的细胞大部分为BMDC。流式细胞术的进一步结果表明，与Control组相比，LPS组表面的细胞分子CD80、CD86、MHC-Ⅱ均显著增加(P值均 < 0.05)；与LPS组相比，LPS+3 mg/mL Em-sAg组、LPS+1.5 mg/mL Em-sAg组、LPS+0.75 mg/mL Em-sAg组、LPS+0.375 mg/mL Em-sAg组中BMDC的CD80显著减少(F=34.870，P < 0.001)，CD86、MHC-Ⅱ无明显减少(P值均＞0.05)。ELISA法的结果表明，不同组间的IL-12 p70的水平差异均有统计学意义(F=73.140，P < 0.05)，与Control组相比，LPS组刺激后IL-12p70的表达量显著升高，差异有统计学意义(P < 0.05)；与阳性对照组相比，LPS+3 mg/mL Em-sAg组、LPS+1.5 mg/mL Em-sAg组、LPS+0.75 mg/ml Em-sAg组、LPS+0.375 mg/mL Em-sAg组均降低IL-12p70的表达量(P值均 < 0.05)，且Em-sAg浓度越高，降低促炎症因子IL-12p70表达量越明显。  结论  不同浓度Em-sAg均可抑制LPS诱导的BMDC成熟度和促炎症细胞因子IL-12p70的表达。

来源：2022年第3期

《临床肝胆病》期刊编辑部

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