临床肝胆病杂志

基金项目: 

国家自然科学基金 (81871965)

  目的  研究6-姜酮酚(6-Paradol)对人肝内胆管癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用及机制。  方法  人肝内胆管癌细胞系HCCC 9810和HUCCT1以不同浓度的6-Paradol及等体积的DMSO(对照组)处理后，采用CCK-8、平板克隆、划痕愈合及Transwell实验检测其增殖、迁移及侵袭能力。应用生物信息学软件Swiss Target Prediction预测6-Paradol作用的蛋白靶点，采用Western blot检测胆管癌细胞中STAT3、p-STAT3、SRC、p-mTOR、p21、Bcl-2以及p53的蛋白表达水平；采用药物亲和反应实验(DARTS)探究6-Paradol与STAT3的相互作用；胆管癌HCCC 9810和HUCCT1细胞分别转染STAT3过表达质粒或sh-p21质粒后，qRT-PCR检测各组细胞中STAT3和p21的mRNA水平，Western blot检测STAT3和p21的蛋白表达量；CCK-8、划痕愈合及Transwell实验检测各组细胞增殖及迁移侵袭能力。计量资料两组间比较采用t检验；多组间比较采用方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。  结果  与对照组相比，6-Paradol处理组中各组细胞的增殖、迁移、侵袭能力明显减弱(P值均＜0.05)。6-Paradol处理组细胞中STAT3、p-STAT3的表达水平较对照组显著下调(P值均＜0.05)，p21的表达水平显著增加(P值均＜0.05)，而Bcl-2、SRC和p-mTOR的表达水平无明显变化(P值均＞0.05)。6-Paradol处理组中STAT3被蛋白酶水解的比例分别减少了48.66%、45.33%(t值分别为16.64、8.76, P值均＜0.05)；分别转染STAT3过表达质粒及沉默p21质粒后，胆管癌细胞中STAT3 mRNA水平均显著增加(tHCCC 9810=2.82，tHUCCT1=5.60，P值均＜0.05)，p21 mRNA水平均显著降低(tHCCC 9810=6.84，tHUCCT1=3.91, P值均＜0.05)。CCK-8结果提示6-Paradol作用48 h及72 h后HCCC 9810细胞和HUCCT1细胞中STAT3过表达组的增殖率较单独给药组显著提高，p21沉默组增殖率较单独给药组也明显提高(P值均＜0.05)。划痕愈合实验结果提示在过表达STAT3或沉默p21的HCCC 9810及HUCCT1细胞中，与单独给药组相比划痕愈合率明显提升(P值均＜0.05)。Transwell实验结果表明，在过表达STAT3或者沉默p21表达的HCCC 9810及HUCCT1细胞中，与单独给药组相比迁移率均明显提升(P值均＜0.05)；在过表达STAT3或沉默p21表达的HCCC 9810及HUCCT1细胞中，与单独给药组相比侵袭率均显著提升(P值均＜0.05)。  结论  6-Paradol通过靶向作用于STAT3-p21通路抑制胆管癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

来源：2022年第4期

《临床肝胆病》期刊编辑部

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