临床肝胆病杂志

作者：范慧娟, 宋淳

单位：空军军医大学第二附属医院消化内科，西安710038

关键词：肝肿瘤, CD100, T淋巴细胞

基金：

  目的  观察肝细胞癌(HCC)患者外周血CD100的变化，探讨CD100对HCC患者T淋巴细胞功能的调控作用。  方法  前瞻性选择2020年4月—2021年7月在空军军医大学第二附属医院就诊的HCC患者57例和对照者22例。采集抗凝外周血，分离血浆和外周血单个核细胞(PBMC)，酶联免疫吸附试验检测血浆可溶型CD100(sCD100)水平，流式细胞术检测CD4+和CD8+T淋巴细胞表面膜型CD100(mCD100)表达。使用重组人CD100刺激HCC患者PBMC，细胞计数试剂盒-8法检测细胞增殖，流式细胞术检测不同类型辅助性T淋巴细胞(Th细胞)和杀伤性T淋巴细胞(Tc细胞)比例，酶联斑点吸附试验检测甲胎蛋白(AFP)特异性CD8+T淋巴细胞分泌穿孔素和颗粒酶B水平。纯化HCC患者CD8+T淋巴细胞，使用重组人CD100刺激后与HepG2细胞共培养，检测AFP特异性CD8+T淋巴细胞诱导HepG2细胞死亡水平。符合正态分布的计量资料两组间比较采用t检验或配对t检验；不符合正态分布的计量资料两组间比较采用Mann-Whitney U秩和检验。计数资料两组间比较采用χ2检验。  结果  HCC组血浆sCD100水平低于对照组[(2.73±0.58)ng/mL vs(3.33±0.84)ng/mL，t=3.584，P＜0.001]。HCC组CD4+T淋巴细胞中mCD100阳性细胞比例(55.57%±11.33% vs 43.67%±6.40%，t=4.636，P＜0.001)和mCD100平均荧光强度(294.80±74.01 vs 255.00±74.01，t=2.126，P=0.037)均高于对照组。HCC组CD8+T淋巴细胞中mCD100阳性细胞比例(48.65%±7.71% vs 41.74%±4.77%，t=3.914，P＜0.001)和mCD100平均荧光强度(289.20±89.30 vs 246.10±60.73，t=2.082，P=0.041)亦均高于对照组。HCC患者PBMC增殖、T淋巴细胞比例在经CD100刺激和无CD100刺激之间差异无统计学意义(P值均＞0.05)。经CD100刺激后，HCC患者PBMC中CD4+IFNγ+Th1细胞、CD4+IL-17A+Th17细胞、CD4+IL-22+Th22细胞、CD8+IFNγ+Tc1细胞比例均高于无CD100刺激(t值分别为2.608、5.663、4.113、4605，P值均＜0.05)，CD8+IL-17A+Tc17细胞和CD8+IL-22+Tc22细胞比例在经CD100刺激和无CD100刺激之间的差异无统计学意义(P值均＞0.05)。HLA-A02限制性HCC患者的PBMC经CD100刺激后，AFP特异性CD8+T淋巴细胞分泌穿孔素和颗粒酶B的细胞数量均高于无CD100刺激(t值分别为6.794、2.308，P值均＜0.05)。CD100刺激后，AFP特异性CD8+T淋巴细胞诱导HepG2细胞死亡的比例亦升高(P＜0.05)。  结论  HCC患者中存在sCD100和T淋巴细胞中mCD100表达失衡，sCD100水平降低可能无法维持T淋巴细胞功能活性，造成HCC免疫耐受。

来源：2023年第1期

《临床肝胆病》期刊编辑部

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